病毒载量的检测及其意义

发表日期:2005/6/28 20:19:45 | 来源 :未知
在HIV的各种检测中,其中一项为病毒水平定量检测。它包括HIV-1 p24抗原定量检测、血浆/淋巴细胞中病毒培养定量检测、血浆中病毒RNA定量检测及淋巴细胞cDNA定量检测。其中较为敏感、准确的方法应为血浆中病毒RNA定量检测法。

它可以准确的测定出每毫升血浆中HIV RNA的含量。

    自90年代初,血液中HIV RNA的定量检测已被公认为可以预估病人病程,并可利用于鸡尾酒疗法的效应的评估。利用病毒载量可在病人急性感染期间,处于空窗期时即可检测出高水平的病毒RNA含量。医师可利用结果判定病人疾病的进程和进展,以及可在接受抗病毒治疗过程中起监测与指导作用。可以在开始治疗前对病人进行HIV RNA水平检测,治疗过程中通过对HIV RNA的一系列测定来指导治疗。例如,如果RNA水平没有降低,那么就应该调整治疗或改变治疗方案;如果RNA复制受到抑制,那么就应持续治疗。

病毒载量检测主要有三种方法:bDNA、RT-PCR及NASBA。bDNA是一种核酸检测技术,它属于信号扩增,而RT-PCR及NASBA则属于靶扩增。bDNA检测中,靶探针是与HIV基因组中的pol基因序列特异性结合,此段序列为所有已知的HIV基因中最保守的区域。RT-PCR检测是通过逆转录(RT)及扩增(PCR)完成特异性扩增HIV gag基因的一段长为142bp的基因序列。由于每个样本中QS的量已知,在扩增及检测后可通过对光密度结果的比较,运用公式计算出HIVRNA拷贝数,从而达到HIV RNA定量的目的。NASBA检测是通过核酸释放、提取(固相提取),核酸扩增(NASBA扩增)及核酸检测(ECL检测)来完成对血浆/血清中HIV病毒RNA的定量测定。RT-PCR、NASBA检测属于PCR方法,其中包括抽提RNA的步骤,所以较容易受污染,而使RNA降解。bDNA与RT-PCR、NASBA相比较有较好的稳定性、线性和可重复性。

血浆中HIV RNA的定量分析,可表现出病毒复制动力学,也反应血浆中游离病毒的浓度,是病毒增殖和免疫清除机制共同作用的结果,因而在判定疾病进程和判定临床治疗效果上具有极大的价值。

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